禽病/生物技術(shù)研究室
依托農(nóng)業(yè)農(nóng)村部禽流感等家禽重大疾病防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省畜禽疫病防治研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開展科研工作,由廖明教授領(lǐng)銜,圍繞畜禽疫病開展診斷試劑和疫苗研制。團(tuán)隊(duì)現(xiàn)有固定工作人員23人,其中高級職稱10人,博士13人。
主要從事重要動物疫病新型分子診斷試劑和生物制品研發(fā),涵蓋禽坦布蘇病毒、鵝星狀病毒及豬病毒性腹瀉相關(guān)病原的致病機(jī)制研究。搭建HRM分型檢測技術(shù)和POCT快速檢測技術(shù)平臺,開發(fā)適合于臨床實(shí)時(shí)檢測病原的方法及精準(zhǔn)分型檢測方法;搭建細(xì)胞懸浮培養(yǎng)工藝技術(shù)平臺,研發(fā)防控豬病毒性腹瀉、禽腺病毒等重要動物疫病疫苗產(chǎn)品;聚焦影響家禽產(chǎn)業(yè)的鵝星狀病毒、坦布蘇病毒和生豬產(chǎn)業(yè)的豬病毒性腹瀉疾病,探究致病原與宿主互作機(jī)制。
先后承擔(dān)國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、國家自然科學(xué)基金、國際科技合作專項(xiàng)、農(nóng)業(yè)公益性行業(yè)專項(xiàng),以及省科技廳、省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳、市科技局等的各類科研項(xiàng)目100余項(xiàng),獲省科技進(jìn)步獎、省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣獎等8項(xiàng),授權(quán)國家發(fā)明專利36件,獲農(nóng)業(yè)農(nóng)村部新獸藥臨床試驗(yàn)批件6個。
新型診斷檢測技術(shù)研發(fā)平臺
圍繞動物疫病鑒別診斷和現(xiàn)場檢測兩大技術(shù)難點(diǎn),搭建了重要動物病原檢測平臺,先后建立了鴨鵝細(xì)小病毒、坦布蘇病毒、鵝星狀病毒、鴨鵝呼腸孤病毒、禽腺病毒、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬瘟病毒、豬偽狂犬病毒、豬乙型腦炎病毒、布魯氏桿菌病等多種重要動物疫病基因分型及POCT檢測方法,以及動物常見病原快速檢測體系。先后發(fā)現(xiàn)鵝新型呼腸孤病毒、禽腺病毒2型、鴨腺病毒4型、鴨星狀病毒5型、豬新型輪狀病毒等多種新發(fā)疫病。
瞄準(zhǔn)國家動物疫病防控和凈化技術(shù)需求,凝練了“鴨坦布蘇病毒病綜合防控技術(shù)”、“禽支原體病綠色防控技術(shù)”、“豬重要疫病凈化控制新技術(shù)”和“豬流行性腹瀉綜合防控關(guān)鍵技術(shù)”,并且連續(xù)多年入選廣東省農(nóng)業(yè)主推技術(shù),以廣東省家禽產(chǎn)業(yè)園和生豬產(chǎn)業(yè)園建設(shè)為紐帶,深入?yún)⑴c省級動物疫病凈化及無疫小區(qū)建設(shè),推動廣東省畜禽養(yǎng)殖業(yè)高質(zhì)量發(fā)展。
獸用生物制品研發(fā)應(yīng)用平臺
聚焦畜禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展技術(shù)需求,與國內(nèi)外疫苗研發(fā)企業(yè)合作,開展細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)工藝、CHO細(xì)胞真核表達(dá)體系、免疫增強(qiáng)劑組合、致弱重組病毒及活 載體疫苗表達(dá)體系等新型疫苗研發(fā)技術(shù)攻關(guān),研制“鴨坦布蘇病毒病滅活疫苗(JM株)”、“鴨傳染性漿膜炎活疫苗(1型GD12株)”、“雞新城疫、禽流感(H9亞型)、禽腺病毒?。↖群4型)、雞滑液支原體四聯(lián)滅活疫苗(D-VII株+HuN20株+SD15株+HLJ株)”、“禽腺病毒(I群4型)卵黃抗體”、“豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉、豬δ冠狀病毒病三聯(lián)滅活疫苗(SD14株+HuN16株+HeN17株)”、“豬偽狂犬病滅活疫苗(WuC-?gE/gI株)”獲得農(nóng)業(yè)農(nóng)村部臨床試驗(yàn)批件,其中“鴨坦布蘇病毒病滅活疫苗(JM株)”和“豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉、豬δ冠狀病毒病三聯(lián)滅活疫苗(SD14株+HuN16株+HeN17株)”正在注冊,“雞新城疫、禽流感(H9)、禽腺病毒(I群,4型)三聯(lián)滅活疫苗(LaSota株+HS株+DN株)”正在復(fù)核。
長期與勃林格殷格翰動物保?。ㄖ袊┯邢薰鹃_展豬繁殖與呼吸綜合征疫苗的異源毒株攻毒保護(hù)效果評價(jià)工作,為生豬養(yǎng)殖業(yè)臨床疫苗選擇提供參考;與天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司、齊魯動物保健品股份有限公司、哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司、乾元浩生物股份有限公司等國內(nèi)知名生物技術(shù)企業(yè)聯(lián)合開展家禽技術(shù)服務(wù),為家禽養(yǎng)殖業(yè)提供生物制品臨床效果評估、疫病精準(zhǔn)診斷和防控方案制定。
病原與宿主互作機(jī)制研究平臺
(一)闡明PEDV與宿主細(xì)胞相互作用的機(jī)制
1.運(yùn)用比較蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定了PEDV增殖中發(fā)揮關(guān)鍵作用的宿主因子,分析了PEDV感染的差異蛋白,篩選了PEDV感染所需的關(guān)鍵受體,獲得了PEDV感染中發(fā)揮重要作用的宿主蛋白。
2.基于非靶向代謝組學(xué)分析PEDV對宿主細(xì)胞的代謝調(diào)控機(jī)制,解析了PEDV感染細(xì)胞的差異代謝成分和代謝網(wǎng)絡(luò),找到了在PEDV天然免疫中發(fā)揮作用的代謝通路,篩選到了一種促進(jìn)PEDV增殖的代謝產(chǎn)物。
3.建立了豬全基因組GeCKO文庫,篩選了PEDV感染中關(guān)鍵的宿主因子,獲得了穩(wěn)定表達(dá)Cas9的IPEDC-J2細(xì)胞系,篩選了促進(jìn)/抑制PEDV增殖的宿主因子。
4.闡明了IFN-λ3通過TLR7/9和MyD88激活JAK-STAT通路,活化干擾素刺激反應(yīng)元件,促進(jìn)PKR、OAS1和ISG15等表達(dá)發(fā)揮抗PEDV的作用機(jī)制。
5.創(chuàng)建了豬的細(xì)胞系改造平臺,通過RNA干擾技術(shù)、CRISPR基因敲除技術(shù)和受體表達(dá)技術(shù),培育3株有效增殖PEDV的細(xì)胞株,為研發(fā)新型疫苗提供了支撐。
6.開發(fā)具有抗PEDV活性的中藥提取物或化合物,篩選PEDV增殖賴以生存的信號通路的抑制劑(中藥提取物),負(fù)向調(diào)控PEDV感染所需代謝通路的代謝產(chǎn)物(化合物),發(fā)現(xiàn)了抗PEDV的代謝衍生物和中藥提取物,作為疫苗防控PED的有效輔助手段。
(二)闡明坦布蘇病毒、鵝星狀病毒與宿主細(xì)胞相互作用的機(jī)制
1.建立坦布蘇病毒反向遺傳操作平臺和疫苗研制平臺,證實(shí)E和NS蛋白與宿主因子TBK1互作從而影響病毒復(fù)制,明確E蛋白是影響TMUV在雞體內(nèi)復(fù)制能力的關(guān)鍵病毒蛋白。證實(shí)鴨驅(qū)動蛋白KIF2A能夠促進(jìn)病毒復(fù)制,而Viperin蛋白抑制病毒復(fù)制。
2.建立雛鵝“痛風(fēng)”發(fā)病模型,闡明波形蛋白與鵝星狀病毒VP70蛋白及其RNA相互作用促進(jìn)病毒復(fù)制,證實(shí)鵝星狀病毒通過抑制過氧化氫酶基因的表達(dá)來抑制宿主的氧化還原反應(yīng);激活Toll樣受體2途徑以增強(qiáng)免疫炎癥反應(yīng);激活乳酸合成中的關(guān)鍵酶以產(chǎn)生抑制宿主抗病毒反應(yīng)的乳酸積累,從而促進(jìn)病毒自身的復(fù)制。